冷冻干燥机冻干保存细菌菌种操作步骤

2019-09-19 14:56:13 tfsye 34

  冷冻干燥机用于细菌领域也常被称为菌种冷冻干燥机、细菌冻干机、菌种冻干机等,可以用于冻干保存细菌、菌种等,其操作步骤如下:

1. 所用培养基及冻干保护剂均高压灭菌;

2. 取分离所得细菌菌液或甘油保存的细菌一环,在培养板上分区或蛇形划板(大肠杆菌在麦康凯平板上划板),37℃倒置培养过夜;

3. 取一只干净的试管,倒入约10mL培养液(大肠杆菌用LB培养液),从培养过夜的平板中挑取一个单菌落于该培养液中,37℃振荡培养过夜;

4. 取10个干净的西林瓶,每瓶加入1mL冻干保护剂,再加入1mL培养过夜的菌液,盖上橡胶塞,留出气孔,标记好之后放入-80℃冰箱使其冷冻;

5. 启动冷冻干燥机预热约30min,迅速将已冷冻的菌液放于冷冻干燥机上,一般十几小时之后细菌已冻干,关闭冷冻干燥机,取出已冻干的细菌,压盖,放于-80℃超低温冰箱保存,可达十年之久。

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